PlantScreen植物表型成像分析系統應用——氣孔運動調節機制與相關表型分析

葉片表面的保衛細胞能夠調節氣孔開放，從而使植物與大氣間進行氣體交換，讓植物的光合作用與蒸騰作用之間達到平衡。保衛細胞的新陳代謝活性又主要依賴來源于葉肉的糖分。而參與到這一過程中的轉運蛋白及其對保衛細胞功能的貢獻還不清楚。

蘇黎世聯邦理工學院、蘇黎世大學與捷克Photon Systems Instruments (PSI)公司合作，證實了在擬南芥保衛細胞中，單糖/質子協同轉運子糖轉運蛋白1和4（STP1和STP4）是主要的質膜轉運蛋白。結果表明它們的共同作用需要葡萄糖輸入到保衛細胞，提供淀粉積累和光誘導氣孔打開所需的碳源。這一研究成果作為封面文章發表于2020年《EMBO Reports》。

A．stp1stp4雙突變體保衛細胞可溶性糖含量顯著變化；B. 淀粉粒消失

而為了深刻理解這種氣孔運動變化對植物光合與生長的影響，就需要對各種相關擬南芥突變體表型進行全面的綜合分析。研究人員使用了PSI植物表型研究中心的PlantScreen植物表型成像分析系統完成了這一工作。這一系統安裝在FytoScope大型步入式植物生長室內，同時具備光適應室和稱重澆灌單元，能夠準確模擬各種植物培養環境。其自動化傳送系統可以實現320株高50cm樣品的同步培養和自動化成像測量。這套系統配置的表型成像分析單元包括：

糖轉運蛋白stp突變體造成擬南芥氣孔關閉后，直接影響到的就是擬南芥的蒸騰作用，進而使光照條件下的葉片溫度升高。紅外熱成像分析表明，各種stp突變體的葉溫都比野生型有所升高。stp1stp4葉溫升高尤其顯著，這表明其氣孔閉合程度大。測量氣孔導度gs進一步驗證了這一點。

A．不同擬南芥突變體的紅外熱成像圖；B. 歸一化葉片溫度變化曲線；C. 不同光暗條件下的氣孔導度gs變化

    VNIR高光譜成像獲得的歸一化植被指數NDVI是遙感和表型研究中常用的植被指數。NDVI與葉綠素含量具備正相關關系，也常被用來估算葉綠素含量。結果表明，stp1stp4的NDVI與其他突變體和野生型是可比的。基于RGB成像色彩分析功能獲得的綠度色彩豐富度，也表明在綠度分布上stp1stp4與其他突變體和野生型也沒有顯著差異。這表明stp1stp4突變體還是具備完整功能的光合機構。

A．VNIR高光譜成像獲得的NDVI成像圖；B. NDVI變化曲線；C-E. 基于RGB成像色彩分析功能的綠度色彩豐富度

而葉綠素熒光成像結果表明，stp1stp4的光系統II大光化學效率Fv/Fm、實際光化學效率ΦPSII、光適應大光化學效率Fv’/Fm’，光化學淬滅qP等光合能力相關參數都有顯著降低。

A．實際光化學效率ΦPSII成像圖；B. ΦPSII變化曲線

    RGB形態表型分析結果，與野生型相比，stp1stp4突變體的生長減少了60%，而且生長速率也要更低。而其他突變體的生長多只降低20%。

I. RGB成像圖；J. 投影蓮座面積變化曲線

這一研究工作充分利用了PlantScreen植物表型成像分析系統的優勢：高通量樣品自動培養與測量、無損表型成像功能實現了對同一植株的連續跟蹤測量、全面的表型分析數據（形態、光合、反射光譜、溫度）。

綜合表型分析結果，研究人員認為STP1和STP4基因的同時突變造成擬南芥散布性氣孔限制，使葉肉光合作用所需的CO₂有效性降低。這就解釋了stp1stp4突變體光合能力降低、葉肉碳水化合物代謝變化，以及后導致的生長表型缺陷。

參考文獻：

Flütsch S, et al. 2020. Glucose uptake to guard cells via STP transporters provides carbon sources for stomatal opening and plant growth. EMBO Reports 21:e49719

北京易科泰生態技術公司提供植物/藻類表型與脅迫響應研究全面技術方案：

• FluorPen/AquaPen手持儀葉綠素熒光儀
• Monitoring Pen葉綠素熒光自動監測儀
• FluorCam葉綠素熒光成像系統
• FKM多光譜熒光動態顯微成像系統
• FMT150/MC1000/ET-PSI藻類培養與在線監測技術
• Thermo-RGB紅外熱成像技術
• SpectraPen/PolyPen、Specim高光譜測量技術
• PlantScreen植物高通量表型成像分析平臺